细胞划痕实验

当细胞长成近100%密度单层状态时，在该单层细胞上人为划出空白区域--划痕，在所划出痕迹边缘的细胞会逐渐进入到划出的空白区域，使痕迹愈合。

我们为什么要做细胞划痕实验？

细胞划痕实验优点包括：

1.它一定程度上模拟了细胞在体内的迁移；

2.适合研究细胞与细胞，细胞与胞外基质之间因为相互作用而导致的细胞迁移；

3.重要的是该实验简单，价格便宜！

细胞划痕实验常用材料

6孔板、marker笔、直尺、100ul黄枪头、PBS、基础培养基等

细胞划痕步骤：

1.画线：用marker笔在6孔板背后，用直尺比着均匀画线，每隔0.5-1cm画一条线，横穿过整排孔。每孔穿过4-5条线。
2.铺细胞：在6孔板孔中加入约50万个细胞（每种细胞有所差异，保证过夜能长到100%）。
3.划痕：第二天，细胞长满后，用100ul黄枪头垂至背后的横线在孔中划痕。
4.清洗：用PBS清洗细胞3次，以洗掉划下的细胞，加入无血清的基础培养基（此时可以加入药物，以研究该药物对细胞迁移的影响）。
5.拍照：放入细胞培养箱中培养。根据实验需要在不同时间点拍照。

6.分析：可用Image J软件对伤口闭合度进行评估

    
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细胞划痕实验注意事项：

1.细胞划痕实验选择细胞时尤其适用于具有迁移能力的上皮细胞，避免选择生长缓慢、贴壁不牢、长不满或堆积生长的细胞，如巨噬细胞等。

2.在划痕前细胞要铺满，但不能长得又太密，否则可能在划痕时成片滑落。

3.一般使用无血清的基础培养基培养，如果培养时间久或者无血清对细胞影响严重，可以用1%血清，但血清浓度最大一般不超过2%。

4.拍照时，每个时间点拍照的位置要一致，要拍同一个地方，否则结果无法分析。

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